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240919
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2018-04-18
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介绍大肠杆菌检测PPT

介绍大肠杆菌检测PPT免费下载是由PPT宝藏(pk10分析软件 www.deufs.com)会员weishenhe上传推荐的疾病课件PPT, 更新时间为2018-04-18,素材编号240919。

这是介绍大肠杆菌检测PPT,大肠杆菌的历史;大肠杆菌的一般特性;培养及生化特性;大肠杆菌的基本结构;大肠杆菌的特殊结构;抗原及血清型;致病性;非致病性大肠杆菌的作用;微生物学的诊断;防治,欢迎点击下载介绍大肠杆菌检测PPT哦。F因子:又称致育因子,插入、复制和转移的功能。有F因子的大肠杆菌为雄性,用F+表示,不含F因子的大肠杆菌称为雌性,用F-表示。通过F+和F-细菌的接合,F因子可经性菌毛传递给F-菌株,使F-菌株转变为F+菌株。

大肠杆菌大肠杆菌的历史肠杆菌科,为革兰氏阴性杆菌。根据生化反应、血清学试验、DNA同源性研究,肠杆菌科至少包括28个菌属,110个以上的菌种。埃希菌属(Escherichia)中最重要的是大肠埃希菌(E. coli) ,常称为大肠杆菌。大肠杆菌广泛分布于自然界,包括腐生菌、寄生菌和人及动物的病原菌。多数是人和动物肠道正常菌群的重要成员。 20世纪中叶,认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症。一 、大肠杆菌的一般特性 1、G-直短杆菌,两端钝圆,散在或成对。 2、周身鞭毛,能运动,无芽孢 ,有的有荚膜。 3、代谢能力强,代谢类型是异养兼性厌氧型 。 二 、培养及生化特性 1、培养特性 ① 兼性厌氧;     ② 最适生长温度37℃,最适生长pH7.2~7.6;     ③ 普通琼脂培养基:生长良好,圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,直径约2~3mm; ④ 普通肉汤培养基:均匀浑浊,管底有粘性沉淀,液面管壁有菌环。 ⑤ 肠道菌鉴别培养基麦康凯琼脂培养基:红色菌落。伊红美兰琼脂培养基:黑色带金属闪光的菌落。 SS琼脂培养基:一般不生长或生长较差,生长者呈红色。 ⑥血平板:一些致病性菌株常β溶血。 2、 生化特性 (1)三糖铁培养基 ①配方牛肉膏 5g 硫酸亚铁 0.2g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL 蛋白胨 20g 硫代硫酸钠 0.2g 蛋白胨 5g 琼脂 1 2g 乳糖 10g 2%酚红溶液 12.5ml 蔗糖 10g 葡萄糖 1g ②原理测定细菌对葡萄糖、乳糖及蔗糖的发酵反应,以及能否产生硫化氢??杉鸪Φ谰?。 三、大肠杆菌的基本结构 (一)细胞壁 大肠杆菌的细胞壁分外膜和肽聚糖层。外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分,主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素,也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有成分,主要与抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。 (二)质粒 F因子:又称致育因子,插入、复制和转移的功能。有F因子的大肠杆菌为雄性,用F+表示,不含F因子的大肠杆菌称为雌性,用F-表示。通过F+和F-细菌的接合,F因子可经性菌毛传递给F-菌株,使F-菌株转变为F+菌株。 R因子 :抗性转移因子和抗性决定因子 。 Col因子:产大肠杆菌素因子,编码合成大肠杆菌素 。 四、大肠杆菌的特殊结构 1、荚膜 荚膜具有抗原性,构成了大肠杆菌的表面抗原,即K抗原 。 2、鞭毛由鞭毛蛋白组成,构成了细菌的鞭毛抗原,与运动有关。 3、菌毛 在细胞表面还含有一种比鞭毛更细更短更硬的丝状体叫菌毛,可分为普通菌毛和性菌毛?! ?五、抗原及血清型(一)抗原 O抗原,即菌体抗原,为细胞壁脂多糖。该抗原刺激机体主要产生IgM类抗体。 H抗原, 即鞭毛抗原 ,H抗原主要刺激机体产生IgG类抗体,与其他肠道菌基本无交叉反应。 K抗原,即荚膜抗原,位于O抗原外层,为多糖。具有K抗原的菌株不能被其相应的抗O血清所凝集叫“O不凝集性”。据耐热性不同,K抗原又分为:L、A和B 三型。 L型K抗原:对热敏感,100℃ 1h破坏其抗原性,并失去与相应抗体的结合力和凝集性,位于被膜中,偶见于荚膜中。 A型K抗原:耐100℃ 1h ,但121℃ 2.5h破坏其抗原性和O不凝集性,但保留与相应抗体结合能力。位于荚膜中,抗A血清可使具有相应A抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。 B型K抗原:100℃ 1h 破坏其抗原性与相应抗体的凝集性,但保留其与相应抗体结合力。 (二)血清型可用O:K:H排列表示其血清型。如:O8:K23:H19,表示该菌具有O抗原8,K抗原23,H抗原为19。致人畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌,除含K抗原外,还可含有蛋白质性粘附素抗原。对粘附素抗原应并列写于多糖K抗原之后。如:O8:K87,K88:H19 中 K88即为粘附素抗原。六、致病性(一)致病物质 1、定居因子(Colonization factor ,CF);也称粘附素,即大肠杆菌的菌毛。 2、肠毒素是肠产毒性大肠杆菌在生长繁殖过程中释放的外毒素,分为耐热和不耐热两种。 ①耐热(ST):100℃20min不破坏,免疫原性弱。 ②不耐热(LT):65 ℃30min破坏,免疫原性强。 3.其他:细胞壁脂多糖的类脂A具有毒性;K抗原有抗吞噬作用,有抵抗抗体和补体的作用 。 (二)所致疾病 1.肠道外感染:多为内源性感染,以泌尿系感染为主;大肠杆菌可侵入血液,引起败血症;大肠杆菌性脑膜炎 。 2.急性腹泻(1)肠产毒性大肠杆菌(ETEC)(2)产志贺毒素大肠杆菌(STEC)(3)肠致病性大肠杆菌(EPEC)(4)肠出血性大肠杆菌(EHEC)(5)肠侵袭性大肠杆菌(EIEC )(6)肠粘附性大肠杆菌(EAEC) 肠产毒性大肠杆菌(ETEC) 七、抵抗力大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强。 55℃加热60min或60℃加热15min仍有部分细菌存活。胆盐、煌绿等对非致病性大肠杆菌有选择性抑制作用,而对致病性大肠杆菌无抑制作用,所以用肠道选择鉴别培养基来分离致病性大肠杆菌。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感。八、非致病性大肠杆菌的作用?;こΦ赖奈⑸胶?。消耗肠道内的氧气,创造厌氧环境,利于厌氧菌的生长;分解代谢产物供厌氧菌生长。能合成维生素K和B。对外袭菌有拮抗作用。某些大肠杆菌能产生大肠菌素,对一些病原微生物具有拮抗作用。九、微生物学的诊断 1、病料的采集:肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等,腹泻者取粪便。 2、分离培养:粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。其他病料可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。37℃培养18~24h后,观察菌落并涂片染色镜检。 3、生化鉴定:大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和木胶糖等产酸产气。 IMViC试验为“+ + - -”。即为典型大肠杆菌。 4、血清型鉴定假定试验:取经生化试验证实的大肠杆菌培养物,用致病性大肠杆菌,侵袭性大肠杆菌和产毒素大肠杆菌多价O血清和出血性大肠杆菌的O157血清做玻片凝集试验。当与某一种多价O血清凝集时,在与该多价O血清的单价O血清做实验。如与某一单价O血清发生强凝集反应,则为假定试验阳性。证实试验:制备O抗原悬液。原效价为1:160~1:320的O血清,用0.5%盐水稀释至1:40。稀释血清与抗原悬液在10mm×75mm试管内等量混合,做试管凝集试验?;煸群蠓庞?0℃水浴箱内,经16h后观察结果。如出现凝集,可证实为该O抗原。 假定试验 5、Stx2e的检测 (1)Vero细胞毒性试验;(2)小鼠神经毒性试验; (3)抗Stx2e抗体中和试验;(4)PCR方法对Stx2e基因特异序列的扩增。 6、ETEC肠毒素检测 (1)检测LT的常用方法:兔回肠结扎肠试验;ELISA;中国地鼠卵巢细胞培养法;平板免疫溶血试验; (2)检测ST常用方法有:乳鼠胃内投服试验;GM1-ELISA等。 十、卫生细菌学检查 1、细菌总数:检测每毫升或每克样品中所含细菌数,采用倾注培养计算。 2、大肠菌数检验:指100g1000mL水中所含大肠菌群的最近似数(MPN),采用乳糖胆盐发酵试验检测。十、防治母源抗体能?;び仔蟮挚怪虏⌒源蟪Ω司?。相应血清型的灭活苗,亚单位苗具有免疫预防作用。治疗可选用庆大霉素、丁胺卡那霉素等。使用微生态制剂:治疗出生幼畜下痢。

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